米托坦(Lysodren)联合治疗在肾上腺皮质癌中的抗肿瘤作用

　　米托坦 (Lysodren) 是一种肾上腺素溶解药物，用于肾上腺皮质癌 (ACC) 的辅助和晚期治疗。电离辐射 (IR) 也用于肾上腺癌治疗，尽管其生物学作用仍然未知。为了提供可靠的 ACC 体内临床前模型，我们使用带有人类 ACC 的小鼠异种移植物来测试米托坦 (Lysodren) 和 IR 单独和组合的效果。我们通过 RECIST 标准评估了肿瘤生长抑制，并通过流式细胞术 (FCM) 分析了细胞周期。在联合使用米托坦/IR 治疗的异种移植 ACC 模型中，我们观察到与单独使用米托坦和 IR（p<0.05）相比，肿瘤生长得到显着抑制，肿瘤消退（p <0.0001）强烈。米托坦结果证实了其抗类固醇生成活性 (p< 0.05) 在异种移植 ACC 模型中，揭示了其使癌细胞更容易接受放射治疗的能力。此外，为了解释这些处理对错配修复系统 (MMR) 的生物学效应，我们干扰了未处理和米托坦/IR 处理的 H295R 和 SW13 细胞系中的 MSH2 基因表达。此外，我们观察到，在用米托坦/IR 处理诱导 DNA 损伤后，H295R 和 SW13 细胞系中的 MSH2 基因抑制不允许 DNA 损伤修复，从而诱导细胞死亡。总之，米托坦似乎具有放射增敏特性，并且当与 IR 联合使用时，能够促进肿瘤生长抑制，导致由于细胞死亡而导致的肿瘤大小显着减小。

　　米托坦 (Lysodren) 和 IR 的结合可以代表一种对抗 ACC 的新策略。我们之前关于 ACC 细胞系的体外数据显示米托坦在联合给药时能够增加 IR 效应。特别是H295R和SW13细胞系中的IR在细胞周期的G2期诱导阻滞，当联合加入米托坦时，该阻滞变得不可逆。这种效应伴随着 cdc2 高激酶活性的增加和细胞周期蛋白 B1 的上调。此外，我们证明细胞周期蛋白 B1 和 cdk2 复合物强烈参与这些生物过程。事实上，使用选择性 cdk-1 抑制剂 purvalanol A 能够克服细胞周期延迟诱导的细胞凋亡。

　　在本研究中，我们专注于这种联合疗法在体内的效果。特别是，我们评估了米托坦 (Lysodren) 和 IR 在 ACC 异种移植模型中单独和组合的效果。

　　单独使用米托坦 (Lysodren) 和 IR 治疗可有效抑制肿瘤生长，但随后出现肿瘤生长的逐渐恢复，尽管 IR 的细胞减灭作用似乎更大。不幸的是，大约 2 周后，异种移植肿瘤显示出从 IR 诱导的抑制作用中逃脱。相反，米托坦/IR组合能够完全抑制肿瘤生长。MRI 能够在治疗期间准确评估肿块的体积。T2-W 体内成像使我们能够监测治疗，证明用 IR 和米托坦/IR 治疗的小鼠的肿瘤样本中存在坏死和纤维化。如 MRI 所示，这一特征得到了动物尸检后宏观观察的支持。IR 确实只负责显着减少异种移植肿瘤，而米托坦/IR 不仅能够减少肿瘤体积，而且在治疗小鼠的肿瘤中显示出纤维化替代区域。尽管放射疗法很有希望，但仅用 IR 治疗小鼠异种移植肿瘤的可能性可能会使动物面临复发的风险。用 IR 治疗的小鼠的组织学发现确实证实了肿瘤质量显着减少，即使在坏死组织周围持续存在肿瘤细胞巢。有趣的是，只有属于经 MTT/IR 治疗的肿瘤的组织学样本在治疗 14 天后显示存在坏死组织和不存在肿瘤细胞。我们相信这一发现可以为 ACC 的治疗提供新的途径。但在治疗小鼠的肿瘤中也显示出纤维化替代区域。尽管放射疗法很有希望，但仅用 IR 治疗小鼠异种移植肿瘤的可能性可能会使动物面临复发的风险。

　　与单独使用米托坦 (Lysodren) 或 IR 相比，米托坦/IR 治疗对皮质酮水平的抗类固醇生成作用明显更高。这些数据与我们之前的体外工作一致。虽然米托坦控制激素分泌，但它本身并不能抑制细胞生长。相反，IR 本身对类固醇生成没有影响。我们相信这种组合可能允许克服这些治疗的单一限制，从而提高受功能性 ACC 影响的患者的依从性。

　　法斯纳赫特等人已经在一项对受 ACC 影响的患者的回顾性研究中确定了放射治疗的机会。随后，来自德国和美国的其他研究支持了这些数据。Sabolch 等人在 20 名接受 Ro 或 R1 切除术的患者的回顾性系列中，证明了局部控制的显着术后改善，随后进行了辅助放疗。最近，欧洲内分泌学会与欧洲肾上腺肿瘤研究网络 (ENSAT) 合作制定的 ACC 管理临床实践指南建议考虑对选定患者进行放射治疗（R1，III 期 RX）。然而，专家小组并未就辅助放疗达成明确共识。我们的研究结果显示了放疗和米托坦 (Lysodren) 联合治疗在 ACC 异种移植模型中的疗效。这些结果需要在临床环境中进一步确认。

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