耐药的慢性骨髓细胞对普纳替尼/帕纳替尼高度敏感

　　酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 疗法的出现大大提高了慢性粒细胞性白血病 (CML) 患者的生存率。事实上，伊马替尼、达沙替尼或尼罗替尼对 BCR-ABL 的抑制会在大多数患有这种疾病的患者中引发持久反应。此外，由于激酶结构域突变对伊马替尼的耐药性通常可以使用达沙替尼或尼罗替尼来规避，但对这些 TKI 不敏感的多重耐药 T315I 突变迄今为止仍然是一个主要的临床问题。在这一行中，普纳替尼/帕纳替尼已成为具有各种 BCR-ABL 突变，尤其是 T315I 突变患者的有希望的治疗选择。然而，令人惊讶的是，普纳替尼/帕纳替尼对伊马替尼耐药 CML 细胞系的作用尚未得到广泛研究。因此，在本研究中，我们使用了几种对 TKI 具有不同抗性机制的 CML 细胞系来评估普纳替尼/帕纳替尼对细胞活力、细胞凋亡和信号传导的影响。我们的研究结果表明，普纳替尼/帕纳替尼对敏感和耐药 CML 细胞系都非常有效，无论耐药模式如何，而且对携带天然 BCR-ABL 或 T315I 突变的 BaF3 鼠 B 细胞也非常有效。我们得出结论，普纳替尼/帕纳替尼可以有效地用于所有类型的 TKI 耐药患者。

　　本研究中描述的发现证实并扩展了 O' Hare 等人先前报道的工作。在携带天然和突变 BCR-ABL 的敏感 CML 细胞系和 BaF3 细胞中。然而，我们的工作首次研究了三种不同 TKI 对一组伊马替尼耐药细胞系的影响。我们的结果表明，无论对伊马替尼的耐药模式如何，普纳替尼/帕纳替尼在体外对所有 CML 细胞系均有效。有趣的是，在我们手中，携带 G250E 突变的细胞对普纳替尼/帕纳替尼的作用似乎不如携带 T315I 突变的细胞敏感。事实上，普纳替尼/帕纳替尼对 BCR-ABL 和 CRKL 的去磷酸化在携带 G250E 突变的 BaF3 中效果较差。这与最近的文献数据一致，这些数据显示 BaF3 细胞增殖测定的 IC50 值与普纳替尼/帕纳替尼的 CRKL 去磷酸化之间的解偶联 。因此，本研究的一个有趣观察是 BCR-ABL 和 CRKL 磷酸化之间的部分断开。

　　CRKL 是 BCR-ABL 的直接底物，因此寻求 CRKL 磷酸化状态作为 BCR-ABL 之一的反映。尽管普纳替尼/帕纳替尼对 BCR-ABL 的去磷酸化在 10-30nM 时几乎完成，但只有更高浓度的普纳替尼/帕纳替尼 (100nM) 能够有效地使 CRKL 去磷酸化。这些结果与 O Hare 等人的结果非常一致。BCR-ABL 和 CRKL 磷酸化部分断开的一种可能解释是，在伊马替尼耐药细胞中，包括 ERK1/2、Fyn 和/或 Lyn在内的其他激酶的重新激活] 有助于独立于 BCR-ABL 调节 CRKL 磷酸化。由于需要更高浓度的普纳替尼/帕纳替尼来抑制 SRC 激酶，这将很好地解释伊马替尼耐药细胞对普纳替尼/帕纳替尼的敏感性较低。根据这一假设，我们之前曾报道过，K562 细胞中伊马替尼耐药需要 Lyn/ERK1/2 轴。因此，很有可能推测 Lyn/ERK1/2 模块可以独立于 BCR-ABL 调节 CRKL 磷酸化。Lyn 已被证明在嗜中性粒细胞中募集 CRKL的观察结果强化了这一假设。

　　总之，我们在此首次表明，普纳替尼/帕纳替尼在不同的耐伊马替尼 CML 细胞系中可高效诱导细胞死亡。对难治性 CML 和其他血液系统恶性肿瘤患者口服普纳替尼/帕纳替尼的 II 期临床试验评估正在进行中。我们的研究结果表明，除了 T315I 患者外，普纳替尼/帕纳替尼可广泛用于耐药 CML 患者，无论对一线 ITK 的耐药模式如何。微信扫描下方二维码了解更多：