舒尼替尼Sunitinib使RFA释放的原位肿瘤抗原能够激活TSA免疫反应

　　RFA（微创射频消融）诱导的原位肿瘤细胞凋亡为诱导抗肿瘤免疫创造了抗原来源。在我们独特的小鼠 HCC 模型中，TAg 被肿瘤特异性表达为可追踪的 TSA，这使我们能够研究小鼠对不同治疗的 TSA 免疫力。小鼠被随机暴露于每种单一舒尼替尼（Sunitinib）疗法或联合疗法。RFA 后两周，在每只小鼠中分离 TIL，并用 TSA 表位（包括 TAg 表位 I 和 IV）进行体外刺激。流感表位肽用作非特异性对照。刺激后 5 小时，流式细胞术测定在联合治疗的小鼠中检测到 3% 的产生 IFN-γ 的 CD8+ TIL。这一比例明显高于未经治疗的对照小鼠 (1%)、SU 治疗的小鼠 (1.5%) 和 RFA 治疗的小鼠 (1.5%) 中产生 IFN-γ 的 CD8+ TILs 细胞。

　　在脾细胞中也观察到了这种增加，但不如在 TIL 中那么多。同样，TIL 中产生 TNF-α 的 CD8+T 细胞的频率显着增加（2.46%）和脾细胞（1.3%）在联合治疗的小鼠中检测到。此外，ELISA 检测到血清 IFN-γ 的产生增加, TNF-α和白细胞介素 2 (IL-2) 在联合治疗的小鼠中。这种增加也反映在 qPCR 检测到的 mRNA 水平上。这些结果表明，舒尼替尼治疗使 RFA 释放的原位抗原能够激活 TSA 免疫反应。

　　我们之前证明，肿瘤驱动的 PD-1 上调与 HCC 环境中效应 CD8+T 细胞的耗竭有关。因此，我们研究了舒尼替尼是否允许 RFA 原位释放抗原通过抑制 PD-1 表达来激活抗 HCC 免疫反应。在这方面，我们从接受单药治疗或舒尼替尼和 RFA 联合治疗的小鼠中分离出 TIL。出乎意料的是，RFA 治疗导致肿瘤浸润性 CD8+中 PD-1 表达的额外增加和 CD4+T 细胞。

　　这种 PD-1+CD8+T 细胞和 PD-1+CD4+T 细胞比例的增加被舒尼替尼治疗显着抑制。在接受不同治疗的小鼠的脾细胞中也检测到了类似的效果。舒尼替尼介导的 PD-1 表达抑制可以解释为什么联合治疗能够使 RFA 释放的原位抗原在 HCC 的情况下激活抗肿瘤免疫反应。一致地，qPCR 检测表明，与未治疗的对照小鼠相比，RFA 进一步增加了肿瘤中 PD-1 和 PD-L1 的 mRNA 表达，而舒尼替尼治疗显着抑制了这种增加，从而显着降低了 PD- 1 和 PD-L1 在联合治疗的小鼠中比在单一 RFA 治疗的小鼠中。这些结果表明，舒尼替尼治疗可抑制 RFA 诱导的 PD-1 和 PD-L1 的额外上调，从而激活效应 CD4+和 CD8+T 细胞。更多详情可咨询下方微信。