临床试验一期二期中ALK劳拉替尼对细胞活力的作用影响

　　劳拉替尼是迄今为止非常有效的间变性淋巴瘤激酶（ALK）抑制剂，并且具有出色的中枢神经系统渗透性，外排/流入比为1.5。新兴的一期二期数据已证明其在疾病进展后使用第一代和第二代ALK抑制剂对患者有效。在靶向治疗的时代，人们普遍接受好的治疗应该是预先提供。直到3年CROWN试验将劳拉替尼和克唑替尼进行转移性未治疗的ALK重排非小细胞肺癌（NSCLC）患者进行比较之前的几年中，是否有证据支持先使用劳拉替尼？ 可能为这种方法提供了科学依据。

　　首先他们利用表达非突变或突变EML4-ALK的Ba和 F3细胞模型来模拟未接受过治疗或ALK抑制剂（第一代和第二代）耐药的临床环境。这些细胞被N-乙基-N-亚硝基脲（ENU）诱变，这是一种诱导点突变的有效化学物质。正如作者所指出的那样，ENU诱变的一个局限性是已知会诱导某些单核苷酸取代。然而，他们表明用300–600nM的氯雷替尼治疗可以成功抑制所有单个ALK突变，包括溶剂前沿突变G1202R。对具有单个ALK突变（C1156Y，F1174C，L1196M，G1202R和G1269A）的Ba 和F3细胞进行进一步的ENU诱变筛选，以产生24种对劳拉替尼耐药的化合物突变。

　　为了证实这些化合物突变确实赋予了对劳拉替尼的抗性，创建了表达ALK的细胞系。根据细胞活力分析，ALKG1202R和L1196M双重突变对所有ALK抑制剂均表现出抗性，而ALK G1202R双重突变对克唑替尼敏感，但对第二代ALK抑制剂和氯雷替尼耐药。为了验证具有临床意义的洛拉替尼耐药性突变，对总共20例接受洛拉替尼治疗进展的ALK重排NSCLC患者进行了重复组织活检。在八名对劳拉替尼具有主要耐药性（进展性疾病为好的反应）的患者中，有七名未检测到ALK突变，表明了ALK依赖性耐药机制。

　　其余12例患者对劳拉替尼具有耐药性，其中检测到6种化合物突变。这些是ALK（在劳拉替尼活检前检测到的ALKC1156Y在劳拉替尼活检前检测到的L在氯雷替尼前活检中检测到G1202R）和ALKE1210K。比较劳拉替尼前后的突变谱表明，这些耐药性突变是响应越来越多的有效ALK抑制剂的选择性压力而逐步形成的。作者随后选择了三名患者，并对他们的连续活检进行了全外显子组测序（WES），以表征克隆的进化。首例患者先用克唑替尼，艾乐替尼治疗，然后再用劳拉替尼治疗。 WES分析表明，在未经治疗的标本中存在显性克隆，随后是耐克唑替尼的亚克隆，包含ALK G1202R的耐劳拉替尼的亚克隆，随后是包含ALK的耐劳拉替尼的亚克隆。值得注意的是，这种ALK G1202R双重突变也在ENU诱变筛选中被鉴定出来，并选择在Ba和F3细胞中表达以进行细胞生存力测定。第二例患者接受了连续的克唑替尼，布加替尼和劳拉替尼治疗。

　　克隆分析显示含有ALK E1210K的耐克唑替尼的克隆产生了三个含有ALK的耐布加替尼的亚克隆。含有ALK双重突变的亚克隆在暴露于劳拉替尼超过15个月后，最终成为优势基因并获得了第三个突变G1269A。第三例患者接受了克唑替尼，艾乐替尼，塞立替尼和劳拉替尼治疗，但对劳拉替尼具有主要耐药性。在阿来替尼上进展后观察到含有ALK的克隆，这产生了含有ALK的亚克隆，赋予对劳拉替尼耐药。虽然每次患者使用ALK抑制剂进行治疗时WES和克隆分析对于患者的临床管理都是不切实际的，但Yoda等人进行了广泛而优雅的研究。清楚地证明了通过顺序暴露于含INC的ALK抑制剂，劳拉替尼耐药的双重或三重突变是如何积累的。所以还是比较推荐劳拉替尼的购买，现在劳拉替尼一个月多少钱？在哪里可以购买？？更多详情可咨询下方微信二维码。