治疗效果上TAF衍生的TFV-DP的细胞内积累是否增强

　　我们先前的研究评估了来自上层和下层人类FRT的纯化免疫和非免疫细胞中TFV-DP（TFV的活性形式）的细胞内浓度。我们发现，与CD4 + T细胞和巨噬细胞相比，TFV-DP的浓度在上皮细胞中高100倍，在成纤维细胞中高10倍。在其他研究中，使用共聚焦拉曼光谱法（CRS）和光学相干断层扫描（OCT）结合分析TFV-DP的分布，以测量TFV在完整猪阴道组织中的分布。用低于100微米的空间分辨率进行测量，局部应用后TFV的浓度在上皮细胞中最大，而在基质中则迅速降低。综上所述，这些发现表明TFV-DP在生殖道中具有细胞特异性分布，并表明组织活检浓度可能不能反映预防HIV有性传播所需的生理相关的ARV浓度。认识到ARVs在生殖道的细胞之间分布不均匀，这强调了需要了解组织环境在调节对HIV感染的保护和易感性中的作用。

　　当TFV局部应用到阴道中时，它首先进入顶（腔）表面的上皮细胞，然后它可能通过多种机制从基底外侧释放到上皮下（基质）区室，包括被动扩散和/或转运蛋白，例如乳腺癌抗性蛋白（BCRP）和P-糖蛋白（P-gp）或多药抗性蛋白（MRP）。相反，口服后，TFV通过血流到达生殖道的上皮下基质。在局部和口服给予TFV后，TFV-DP阴道水平存在重要差异。尚不知道上皮细胞和成纤维细胞是否充当TFV-DP的储存区以破坏保护作用，还是在初始摄入后缓慢释放TFV来维持生殖器粘膜的保护作用。

　　我们使用来自子宫内膜（EM），宫颈内膜（CX）和宫颈外膜（ECX）的极化原代上皮细胞和成纤维细胞，我们检查了TFV-和/或TAF衍生的TFV-DP的细胞内积累是否增强或抑制了TFV介导的针对HIV的保护通过干扰CD4+T细胞的可用性。当上皮细胞预装有TAF时，我们发现两种ARV均在基底外侧释放至少3天，其浓度可部分保护CD4 + T细胞免受HIV感染，并且ARV释放部分归因于多药耐药蛋白（MRP）运输商。这些发现表明，上皮细胞和成纤维细胞通过充当抗逆转录病毒储库，在抗逆转录病毒给药后扩展了部分保护作用，从而在整个FRT中对粘膜提供了针对HIV的保护。

　　所有人类学科的工作都是在达特茅斯学院机构审查委员会的批准下进行的。先前已从保护人类受试者委员会（CPHS）获得使用组织的批准，并在手术前获得患者的书面知情同意。所有样本均被匿名化，并根据《赫尔辛基宣言》中表达的原则进行了所有调查。人的FRT组织是在手术后立即从达特茅斯-希区柯克医学中心（新罕布什尔州黎巴嫩）接受子宫切除术的妇女那里获得的。子宫内膜（EM），宫颈内膜（CX）和宫颈外膜（ECX）的组织均来自患有良性疾病的患者，如肌瘤和脱垂（年龄在26至61岁之间）。组织样本远离病理部位，并且没有病理学家确定的病理病变。献血者是匿名的，没有关于年龄或荷尔蒙状况的信息，该研究仅使用女性献血者。

　　通过用完全培养基冲洗并反洗滤膜来回收上皮细胞片，如前所述以500μg离心5分钟，并分析细胞数量和活力。为了建立带有顶端和基底外侧区室的极化人FRT上皮细胞的细胞培养系统，将FRT上皮细胞在Matrigel基质（BD Biosciences）包被的Falcon细胞培养插入物中培养在孔陪伴培养板中。顶室和基底外侧室分别包含300和500μl的完全培养基，每2天更换一次。如前所述，通过使用EVOM电极和伏安计（World Precision Instruments，Sarasota，FL）定期测量跨上皮电阻（TER），评估了EM和CX上皮细胞单层紧密连接的形成情况。为了保持相似的培养条件，遵循相同的步骤来培养不极化的鳞状ECX上皮细胞。那么taf哪能买到？价格是多少？详情可咨询下方微信。