尼达尼布能有效抑制FGFRs和PDGFRs以外的致癌RTKs

　　尼达尼布显示出对FGFR酪氨酸激酶1-3和PDGFR酪氨酸激酶的抑制作用。

　　尼达尼布与同类竞争分子的头对头比较显示，尼达尼布在三重血管激酶面板上更有效，具有更平衡的抑制谱。尼达尼布与舒尼替、vandetanibpazopanib，并行和基于IC50值确定cediranib化验，尼达尼布VEGFR1-3之前报道的效力，PDGFRα和β，FGFR1-3可以复制的IC50值<100nmol/l，略低的IC50值VEGFR23和PDGFRα和β。Sunitinib、vandetanib、pazopanib和cediranib在浓度<100nmol/l时抑制VEGFR-2和-3，但它们对PDGFR的抑制作用较弱，且相对于对FGFR的抑制效果明显下降。cediranib是一个显著的例外，它对fgfr的抑制作用与尼达尼布相当。在这项比较中，索拉非尼是效力最小的药物，在测试的激酶组中IC50值≥100nmol/l。

　　尼达尼布能有效抑制FGFRs和PDGFRs以外的致癌RTKs。

　　先前报道的激酶靶谱显示尼达尼布是一种三血管激酶小分子TKI。为了探索激酶抑制超出之前描述，尼达尼布测试了更广泛的245激酶面板。除了先前报道的13激酶尼达尼布目标，我们21额外激酶也被尼达尼布，IC50值<100nmol/l。在这些新发现的目标激酶是众所周知的管制通过基因改变，因此可以作为致癌因素在人类癌症。这些包括在非小细胞肺癌亚群中改变的激酶，如Ret(2nmol/l；和原肌球蛋白受体激酶A(TRKA)(35nmol/l。激酶Abl1和Kit(分别为13和9nmol/l)也被认为是几种肿瘤类型的突变的驱动因素，包括白血病。尼达尼布还可抑制DDR1和ddr2，这被认为参与了炎症和纤维化过程。

　　TKIs在体外激酶检测中干扰激酶活性的事实并不一定意味着这种活性将转化为细胞活性。正如证明的那样，添加trk特异性抑制剂恩替替尼(entrectinib)可以降低pTRKA和pERK1/2水平，其浓度低至1nmol/l。相比之下，降低pTRKA和pERK1/2水平需要更高浓度的尼达尼布(≥1000nmol/l)。尼达尼布和entrectinib的EC50值计算为955和117nmol/lcuto-3.29细胞和557和2.3nmol/lKM12细胞系，分别为。因此，尽管尼达尼布是一个相对的有效抑制剂TRKA激酶面板，这种力量不转化为抑制受体磷酸化和下游信号在癌症细胞系轴承TRKA重组。

　　为了更详细地研究尼达尼布的细胞抑制能力，我们对该药物在大量细胞系上进行了测试(Ricerca240-OncoPanel)。尼达尼布显示出了疗效对不同适应症的242种癌细胞株中的12种，包括胃癌、慢性骨髓性白血病、AML、NSCLC、肾癌、横纹肉瘤和甲状腺癌。这些细胞系携带驱动突变，可能是尼达尼布的潜在目标。例如，AML细胞系MV-4-11仅表达突变的FLT3ITD等位基因，该等位基因作为致癌驱动因子，并被尼达尼布抑制，GI50为53nmol/l。在12个敏感细胞系中，有10个在16个尼达尼布靶标激酶中发生了突变、扩增或过表达(尼达尼布靶蛋白激酶中不携带突变的两种敏感细胞系是携带418突变的高度突变的A-427(NSCLC)细胞系和携带311突变的肾细胞癌细胞系G-401。此外，a-427细胞系具有高度复杂的扩增模式。图2B所示的16个激酶基因在敏感细胞系和不敏感细胞系中都发生了相似程度的改变。

　　通过查询敏感细胞系所代表的那些肿瘤类型的TCGA数据集，以确定16种尼达尼布靶向激酶的总改变频率。大约42%的胃癌病例在上述16个基因中的任何一个都有分子改变。变化检测在急性髓系白血病和慢性淋巴白血病研究大多是突变与扩增或重组。尼达尼布-sensitive激酶过表达的细胞株，在某种程度上，也在各自的TCGA数据集。总之，尼达尼布-sensitive细胞系从242年癌症面板包含在激酶基因改变尼达尼布的目标。

　　尼达尼布的靶点可能是驱动突变对体外肿瘤细胞系生长的影响。

　　我们测定了NSCLC细胞系NCI-H1703(PDGFRfrfr和FGFR1ampl.)、胃癌细胞系KatoIII(FGFR2ampl.)、子宫内膜癌细胞系AN3CA(FGFR2mut.)和乳腺癌细胞系MFM-223(FGFR2ampl.)对尼达尼布治疗的反应。在较低纳摩尔范围内，尼达尼布处理对4种细胞系的生长均有抑制作用：NCI-H170310nmol/l、KatoIII176nmol/l、AN3CA152nmol/l、MFM-223108nmol/l。

　　与预期的一样，索拉非尼也是NCI-H1703和KatoIII细胞系的弱抑制剂(EC50值分别为258和383nmol/l)。索拉非尼对PDGFR和FGFR激酶的活性非常弱。尼达尼布之间的差异，证实了舒尼替，索拉非尼在NCI-H1703细胞信号通路分析PDGFBB刺激。如图3D所示，尼达尼布和舒尼替尼能够以浓度依赖的方式降低pMAPK、pAKT和pPDGFR的血清水平，降低到10-50nmol/l，而索拉非尼只能在最高测试浓度为1mol/l时才能完全干扰MAPK、AKT和PDGFR的活化。

　　尼达尼布在浓度≥10nmol/l时抑制PDGFBB刺激后MAPK的激活。磷酸化AKT也有同样的作用。此外，在尼达尼布浓度≥30nmol/l时，也可以看到作为细胞凋亡标志的PARP转化为裂解PARP。相比之下，我们还研究了伊马替尼的作用，这种TKI对PDGFR的抑制作用较弱。伊马替尼仅在测试的最高浓度(1000nmol/l)时干扰MAPK和AKT的激活，导致cPARP信号微弱。尼达尼布和伊马替尼之间的这种差异是因为伊马替尼抑制PDGFRB激酶活性的效力较低(10倍)，这一点由伊马替尼与尼达尼布的EC50值证实。

　　NCI-H1703和KatoIII细胞系都有两种遗传扩增。PDGFRA和FGFR1在NCI-H1703细胞中局部扩增，而FGFR2和PDGFRA在KatoIII细胞中扩增。为了确定是哪一种基因改变推动了这两种细胞系的增殖和存活，我们进行了敲除实验。PDGFRAKD中尼达尼布浓度的增加导致pMAPK和pAKT信号的完全丧失。尼达尼布加入FGFR1KD也对pAKT和MAPK信号有影响，但影响程度较小，这表明NCI-H1703细胞主要是由PDGFRA扩增驱动的。

　　在具有尼达尼布靶标驱动突变的癌症适应症中，胃癌显示FGFR2扩增率为4%-10%。我们分析了尼达尼布作为这一组的代表，对KatoIII细胞增殖和生存途径的影响。据报道，该细胞系的FGFR2拷贝数增加为17。尼达尼布抑制该细胞株的增殖，IC50为176nmol/l，并干扰bFGF刺激的KatoIII细胞中MAPK和AKT的活化，分别降低到100nmol/l和30nmol/l。在同一实验中，pan-FGFR抑制剂PD173074以30nmol/l的IC50抑制KatoIII细胞增殖，并以低至10nmol/l的浓度干扰MAPK和AKT。

　　NSCLC腺癌细胞株LC-2/ad携带CCDC6-RET融合作为驱动突变，我们也测试了其对尼达尼布的反应，因为我们发现RET也是该药物的靶点(EC50值=149nmol/l)。在同一实验中，vandetanib，一种基于Ret抑制作用的已上市的治疗甲状腺癌的药物，给出的EC50值为247nmol/l(数据未显示)。

　　基于此前尼达尼布抑制Flt3的报道我们对与小分子BET(溴域和地外)家族抑制剂BI894999(新型BET抑制剂BI894999对癌细胞中HEXIM1的上调和异种移植瘤模型的抗肿瘤活性的影响很感兴趣。尼达尼布与BI894999的结合完全抑制了MOLM-13和MV-4-11-BAML细胞的增殖，而在Flt3野生型细胞系中未见有益作用。

　　尼达尼布在带有尼达尼布靶向驱动改变的肿瘤异种移植物中的体内抗肿瘤作用。

　　由于尼达尼布能在体外有效抑制NCI-H1703NSCLC细胞系的生长，而NCI-H1703NSCLC细胞系具有PDGFR的扩增，因此我们决定分析其在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤效果。体内实验药物剂量的选择是基于先前发表的报告，该报告显示尼达尼布和vatalanib>1mol/l峰值血浆浓度的暴露剂量为100mg/kg。

　　从NCI-H1703细胞的体外活性来看，尼达尼布在体内抗肿瘤作用方面是三种化合物中最强的，在100mg/kg时TGI值为107%，可导致肿瘤收缩。相比之下，PDGFR抑制剂伊马替尼75mg/kg，每天1次或2次，分别达到45%和58%的TGI值。vatalanib每日治疗一次，剂量为100mg/kg，TGI为73%，与抗血管生成药物疗效一致。所有治疗的耐受性都很好，这从所有治疗组在治疗期间的体重增加就可以看出(数据未显示)。

　　尼达尼布单独及联合BET家族抑制剂BI894999的抗肿瘤疗效通过皮下的mm-4-11-bAML模型进行评估。单剂BET抑制剂BI894999的TGI值为78%，尼达尼布为92%，联合用药的TGI值为99%。在联合治疗组中，8只动物中有7只存活到实验结束，只有一种治疗与死亡无关。在BI894999治疗组中，所有的动物都必须在第50天左右按照终止标准实施安乐死，而在尼达尼布组中，有5只动物在第100天实施安乐死。尼达尼布一盒多少钱？尼达尼布在哪儿可以买到？在老挝有100mg和150mg的，想买老挝的和孟加拉碧康的可以咨询康安途。详情请扫码咨询：