奥希替尼显着增强了紫杉醇的抗肿瘤活性而不增加毒性

　　奥希替尼显着增强了紫杉醇的抗肿瘤活性而不增加毒性，本研究试图利用奥希替尼联合常规抗癌药物逆转ABCB1或abcg2介导的MDR。ABC转运体介导的MDR是化疗成功的主要障碍之一。而研究最为广泛的ABCB1和ABCG2是利用ATP水解产生的能量泵出底物化疗药物而导致MDR的产生。幸运的是，一些TKIs，如lapatinib,erlotinib,apatinib和afatinib，被报道抑制ABC转运蛋白的功能，这些TKIs的发现代表了规避MDR的新策略。奥希替尼(AZD9291)是第三代EGFRTKI，对因EGFRT790M耐药突变而接受第一代和第二代EGFRTKIs治疗失败的非小细胞肺癌患者有效。基于此，我们推测奥希替尼可能与ABC转运体相互作用，克服MDR和其他TKIs。

　　正如预期的那样，在奥希替尼超过90%的细胞存活浓度下，奥希替尼显着增强了已知ABCB1和ABCG2底物化疗药物在ABCB1或ABCG2过表达细胞中的效率。同时，奥希替尼并没有改变亲代敏感的KB、MCF-7、S1、H460或HEK293/载体细胞对化疗药物的敏感性。此外，奥希替尼也没有增强顺铂(ABCB1和ABCG2的非底物)在ABCB1或ABCG2过表达细胞中的细胞毒性。以上结果证实了奥希替尼对MDR细胞的体外致敏作用。为了进一步研究奥希替尼是否能在体内增强化疗药物的疗效，我们采用KBv200细胞异种移植裸鼠模型来评估其作用。与生理盐水对照相比，单独使用奥希替尼或紫杉醇均不能明显抑制KBv200细胞异种移植物的生长，但奥希替尼显着增强了紫杉醇的抗肿瘤活性而不增加毒性。

　　逆转ABCB1和abcg2介导的耐药可以通过拮抗ABCB1和abcg2的功能或下调其表达水平来实现。奥希替尼通过抑制ABCB1和ABCG2转运体的外排功能，增加了耐药细胞系DOX和Rho123的胞内积累。此外，ABC转运蛋白利用ATP酶水解释放的能量将底物泵出细胞。因此，ATP水解速率与转运蛋白的转运活性成正比。奥希替尼在低浓度下刺激ABCB1和ABCG2的atp酶活性，支持奥希替尼可能与底物相似，是这些转运蛋白的竞争性抑制剂。此外，奥希替尼与ABCB1和ABCG2之间的相互作用通过与转运蛋白的-IAAP光亲和标记竞争得到证实。所有这些都与我们早期对其他TKIs的发现相一致。

　　由于奥希替尼可以抑制ABCB1和ABCG2的转运功能，我们继续验证奥希替尼是否会影响它们的表达水平。在90%以上的细胞存活浓度下，奥希替尼未改变ABCB1和ABCG2转运蛋白或mRNA水平。此外，奥希替尼并没有改变KBv200和S1-MI-80细胞中ABCB1和ABCG2的膜结合。这表明，在设计的浓度下，奥希替尼没有改变ABCB1和ABCG2的表达和膜位置。作为一种EGFR抑制剂，有报道称奥希替尼可以抑制EGFR、AKT和ERK的磷酸化，这些磷酸化的细胞具有致敏性或T790M耐药突变。此外,PI3K/AKT激活和/或ERK途径与癌细胞获得抵抗化疗。在我们的研究中,奥希替尼没有抑制表皮生长因子受体磷酸化,AKT,或在s1ERK-mi-80和KBv200细胞由奥希替尼细胞生存的浓度超过90%,表明EGFR的封锁,AKT,ERK活性不太可能发挥重要作用在种代号为ABCB1的敏化效果的奥希替尼-和ABCG2-overexpressing细胞。

　　奥希替尼显着增强了紫杉醇的抗肿瘤活性而不增加毒性，AML的治疗失败往往是由于ABC蛋白特别是ABCB1的药物外排对化疗产生耐药性。我们在11个耐药患者中发现了4个样本，这些患者被诊断为高ABCB1表达的急性白血病。ABCB1在4例患者骨髓标本中表达略有差异，因此对奥希替尼致敏反应略有差异。我们发现奥希替尼可以显着增加Rho123在这4个高abcb1表达的原发性白血病母细胞中的积累，并增强DOX的细胞毒性。提示欧莫替尼可使abcb1高表达的白血病细胞对常规化疗药物敏感，可作为临床联合用药对抗abcb1介导的MDR。

　　总之，我们首次提供了体外、体内和体外证据，证明奥希替尼可以增强常规化疗药物对ABCB1-和abcg2过表达细胞的疗效。奥希替尼逆转MDR是通过抑制ABCB1/ABCG2转运功能，导致细胞内积累底物化疗药物的增加，而不是通过下调其表达或改变膜位置。此外，奥希替尼逆转MDR与阻断EGFR、AKT和ERK的磷酸化无关。我们的结果提示，临床应用奥希替尼可与常规ABCB1或ABCG2底物药物联合治疗，以克服ABCB1或ABCG2介导的MDR。奥希替尼多少钱一盒？在哪儿可以买得到？详情请扫码咨询：