CAR-T细胞治疗的具体步骤是什么？CAR-T疗法的过程？

　　CAR-T，全称是Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy指的是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。2017年8月，全球第一种 CAR-T药物获得美国药监局批准，为血液癌患者带来了一线曙光。目前CAR-T的发展迅猛，国内获得临床批件及受理的产品大多数为二代产品，本质的结构上，几代产品相差不大。CAR由胞外区、跨膜区和胞内区三个部分组成，胞外区通常是scFv片段或者纳米抗体。

　　胞内是T细胞活化的分子，如CD28或者41BB、CD3ζ。第一代CAR只有一个胞内信号组份，主要是CD3ζ或FcＲγ，其功能为激发T细胞活性，介导抗肿瘤活性，T细胞可以被活化但无法增殖。第二代CAR具有两个胞内信号组份，增加了CD28、41BB等共刺激分子。第三代CAR具有三个胞内信号域，包括两个串联的共刺激域CD28、41BB或OX40和一个CD3ζ。第四代CAR-T则是在第二代的基础上携带趋化因子，细胞因子，抗体等基因，让其能够在T细胞内表达，增加CAR-T细胞的有效性和安全性。

　　CAR-T细胞治疗具体来看大致上有五个步骤：1.从癌症患者PBMC中分离纯化出T细胞。2.抗CD3和抗CD28的抗体刺激T细胞激活。3.利用基因工程将能特异识别肿瘤细胞的CAR结构转入T细胞。4.体外培养，大量扩增CAR-T细胞至治疗所需剂量，一般为十亿至百亿级别。5.化疗清淋预处理然后回输CAR-T细胞，观察疗效病严密监测不良反应。

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