厄达替尼erdafitinib可增加细胞内紫杉醇的积累

　　厄达替尼（erdafitinib）既不改变ABCB1的表达也不改变细胞定位，我们预计厄达替尼可能抑制ABCB1的功能。为了评估 ABCB1 活性，在有或没有 ABCB1 抑制剂的情况下，在亲本和 ABCB1 过表达细胞系中定量氚标记的紫杉醇的细胞内浓度。通过进行[3H]-紫杉醇积累试验，我们观察到厄达替尼以浓度依赖的方式增加了耐药KB-C2细胞中紫杉醇的积累，而对药物敏感的KB-3-1细胞没有变化。

　　因此，厄达替尼的逆转作用，至少部分归因于紫杉醇积累增加。随后，进行[3H]-紫杉醇外排试验以研究厄达替尼是否通过增加紫杉醇摄取和/或抑制紫杉醇外排来增强紫杉醇积累。厄达替尼不影响药物敏感的 KB-3-1 细胞中的紫杉醇外排，这与紫杉醇积累的结果一致。在耐药 KB-C2 细胞中，厄达替尼治疗显着阻碍了紫杉醇的流出。因此，该结果表明，厄达替尼可以抑制 ABCB1 的外排活性，导致紫杉醇积累增加。

　　据报道，ATP 水解是 ABC 转运蛋白泵出内源性和外源性毒物的能量来源。因此，我们评估了 厄达替尼是否影响 ABCB1 的 ATPase 活性。测量了不同浓度厄达替尼 (0–1 μM) 下的钒酸盐敏感性 ABCB1 相关 ATP 酶活性。厄达替尼浓度依赖性地激活 ABCB1 相关的 ATPase 至基础活性的 140.8%。厄达替尼的刺激作用在 0.07 μM 时达到最大 50% (EC50)。

　　厄达替尼与人类 ABCB1 模型之间的相互作用由对接模拟确定。厄达替尼与 ABCB1 药物结合位点对接，亲和力评分为 -8.5 kcal/mol。根据对接复合物，疏水相互作用是厄达替尼与 ABCB1 蛋白结合的主要因素。具体而言，厄达替尼的吡唑环被 ABCB1 的 Tyr307 和 Phe728 的苯环通过 π-π 堆积相互作用稳定。类似地，厄达替尼的中心喹喔啉也通过与 Phe303 和 Trp232 的苯环的 π-π 堆积相互作用而稳定。此外，厄达替尼位于由 Trp323、Phe303、Ala302、Phe343 和 Ile340 形成的疏水腔中。更多详情可咨询下方微信。