卡马替尼(capmatinib)可减少卵巢癌细胞的迁移和粘附

　　卵巢癌的 5 年生存率约为 40%，而晚期确诊的女性（大多数）仅为 27%。这表明迫切需要新的治疗方法来提高生存率。最近的分子特征极大地提高了我们对这种疾病的理解，并允许识别潜在的新靶点。一种感兴趣的途径是 HGF/c-MET 轴。HGF/c-MET 轴的激活已在某些卵巢肿瘤中得到证实，并被发现与总体存活率降低有关，表明其作为治疗靶点的潜力。本研究的目的是确定一种新型、高效、可口服的 c-MET 抑制剂卡马替尼（capmatinib）在阻断卵巢癌转移中重要的细胞表型方面的功效。使用体外和在体外模型中，我们证明卡马替尼 抑制 HGF 诱导的 c-MET，并减少下游信号传导。卡马替尼处理可降低 HGF 刺激的趋化和随机迁移，达到在未刺激细胞中观察到的水平。此外，通过卡马替尼治疗，HGF 诱导的癌细胞与腹膜组织的粘附显着降低。总体而言，这些数据表明卡马替尼抑制了许多促进卵巢癌转移的细胞行为，值得进一步研究作为治疗卵巢癌患者的候选药物。

　　在美国，每 20 名女性癌症相关死亡中就有 1 名死于卵巢癌，过去 20 年存活率的停滞表明需要改进治疗方法。导致卵巢癌存活率低的主要因素之一是大多数诊断都是在疾病已经转移到整个腹膜腔时做出的27.正是这种分散腹膜/网膜转移的倾向使得卵巢癌难以有效治疗。对于大多数肿瘤类型，转移包括从肿瘤块脱离，侵入周围组织，然后渗入血管或淋巴管，渗入新部位，以及定植/增殖。然而，对于卵巢癌，该过程是不同的，可以分为 6 个主要步骤： 1. 细胞-细胞分离，以及脱落原发性肿瘤。2. 漂浮在腹膜/腹水液中，形成球状体，避免失巢凋亡。3. 细胞附着于间皮。4. 迁移到腹膜或网膜的有利区域（包括血管和乳斑）。5.通过间皮侵入细胞外基质。6. 定植和增殖以形成转移。

　　HGF 和活化的 c-MET 涉及所有这些步骤（上面给出的参考资料），使信号通路成为有效的治疗靶点。此外，在 30-70% 的卵巢癌病例中发现了 c-MET 的高表达，并且与较差的预后相关。

　　迄今为止，已经在 I 期试验中检查了许多阻断该途径的疗法，但在专门针对卵巢癌的 II 期试验中只检查了一种；抗 HGF IgG2人源化抗体 AMG 102。该研究的结论是，尽管该治疗剂耐受性良好，但其活性不足以作为单一药物进行进一步研究。疗效问题可能是由于抗体无法有效渗透到实体瘤中，无法完全隔离 HGF 配体，以及 c-MET 的配体非依赖性激活，所有这些都构成了小分子抑制剂的原因，例如作为卡马替尼（capmatinib），应调查其功效。

　　我们在此报告了小分子 c-MET 抑制剂卡马替尼（capmatinib）在良好表征的卵巢癌细胞系模型以及正常人卵巢表面上皮细胞中的首次研究。使用卵巢癌的转移过程作为我们实验工作的基础，我们在 3 个卵巢癌细胞系中表明，INC280 治疗减少或消除了相关的细胞行为，包括运动和粘附，使用 HGF 刺激来模拟 HGF 在腹水中的存在卵巢癌患者。卡马替尼治疗还消除了正常上皮细胞中 HGF 诱导的 c-MET 磷酸化。在 SKOV3、OVCAR3 和 CAOV3 细胞中，在 24 小时观察到 HGF 刺激磷酸化 c-MET 持续上调，这很可能表明正常细胞中不存在额外的干扰信号通路，可能涉及 Ras 突变或剪接改变CD44，两者都被提议使 c-MET 信号持续存在，并且在卵巢癌中常见。

　　卡马替尼（capmatinib）的持续抑制作用与 Liu等人报道的研究一致，他们证明，单剂量的卡马替尼在体内导致注射后 7 小时 90% 的 c-MET 磷酸化抑制。c-MET 下游的 ERK 和 AKT 信号传导也出现持续抑制，表明该药物有可能每天给药一次或两次，并保持足够的血浆浓度以改变信号传导。

　　关于 c-MET 抑制剂降低细胞增殖能力的结果似乎喜忧参半，一些作者发现体内增殖减少 ，而另一些作者发现没有变化。我们的初步分析表明，由 HGF 刺激引起的任何（适度但不显着）增殖增加都会通过添加卡马替尼（capmatinib）得到抑制。我们还显示单独添加 INC280 对增殖没有影响，考虑到我们的细胞系表达的磷酸化 c-MET 水平低，这不足为奇。Sawada 及其同事推测 c-MET 与腹膜粘连和传播有关，但与肿瘤生长无关。HGF 和 c-MET 的激活先前已涉及赋予卵巢癌细胞凋亡和失巢凋亡的抗性。然而，在我们的初步研究中，在存在 HGF 或 HGF +卡马替尼的情况下，粘附细胞的数量以及附着或分离细胞中的 PARP 切割（数据未显示）没有变化，而卡马替尼对细胞凋亡的影响未定。然而，在描述 INC280 的原始论文中，Liu等人证明卡马替尼分别在肺癌和胃癌细胞系 H441 和 SNU-5 中诱导细胞凋亡，表明需要进一步研究。

　　HGF 最初被称为“散射因子”，因为它能够在体外诱导上皮细胞的侵袭性表型。卵巢细胞在腹膜表面的二维环境中迁移。有证据表明它们优先在腹膜中的血管附近和网膜中的乳斑中定殖，尽管迄今为止几乎没有证据表明细胞是否粘附在其他地方并向这些部位迁移，或者它们是否附着并坚持在此类站点附近。无论如何，腹水中存在高水平的 HGF和腹膜间皮在发炎时的表达, 可能会刺激卵巢癌细胞在腹膜表面的迁移。我们已经在定向（趋化）和随机迁移测定中解决了 HGF 以及随后对 c-MET 的抑制对卵巢癌细胞迁移的影响，以更准确地概括在体内环境中遇到的环境和蛋白质。我们的研究结果进一步支持卡马替尼作为卵巢癌的有效治疗方法，通过阻止细胞向有利的定植位点迁移。

　　我们提供了 c-MET 抑制剂卡马替尼（capmatinib）在体外和离体抑制卵巢癌细胞表现出的许多转移行为的潜在功效的证据.然而，我们不是使用“一刀切”的方法，而是首先建议使用一种生物标志物，例如腹水中的高 HGF 浓度，或肿瘤样本中的高 c-MET/磷酸化 c-MET，来选择患有小肿瘤的患者进行治疗。分子 c-MET 抑制剂。此外，包括卡马替尼在内的小分子 c-MET 抑制剂应与卵巢癌减瘤手术后模型中的现有疗法结合进行测试，以解决其在预防腹水中剩余细胞存活、粘附和迁移方面的有用性，并可能防止微转移的生长。

　　微信扫描下方二维码了解更多：