尼达尼布抑制VEGF诱导的肺MVEC增殖

　　为了评估尼达尼布的最小有效剂量，我们研究了不同浓度的尼达尼布对VEGF刺激下Erk1/2磷酸化的抑制作用，Erk1/2是参与VEGF驱动内皮细胞增殖的下游靶点。尼达尼布在对照组MVECs中以浓度依赖的方式抑制vegf诱导的pErk1/2(P=0.005)。在0.3°M(浓度不会导致形态变化)，20个pErk1/2水平与非刺激条件相似(P=0.02)。这个浓度用于所有后续实验。通过EdU掺入评估，vegf诱导的对照MVECs增殖被尼达尼布降低(P=0.02)。尼达尼布抑制VEGF刺激PAHMVECERK1/2磷酸化，但对PAH患者源性MVEC增殖无显著影响(P=0.15)。

　　尼达尼布衰减VEGF诱导的微血管内皮细胞的增殖。将人原代微血管内皮细胞(MVEC)与指定浓度的尼达尼布孵育，并使用血管内皮生长因子(VEGF)刺激。磷酸化的Erk1/2(pErk1/2)、总Erk1/2(tErk1/2)和actin通过westernblot进行定量。（A）显示了一个代表性的印迹。(B)显示了在未受刺激的MVEC条件下，pErk1/2/tErk1/2(对照n=5，PAHn=4)的密度定量比值，表示倍数增加。采用单因素方差分析(one-oneANOVA)来确定统计学意义。数据以平均值±SEM表示。采用EdU染色(对照组n=5，PAHn=4)评估VEGF刺激联合0.3个不同浓度的预处理后MVEC的增殖情况，进行比例配对t检验(C)。

　　尼达尼布不影响肺血管重建

　　为了评估体内效应，我们从第8周开始给SuHx大鼠使用尼达尼布治疗3周。房车结束后降低舒张压直径尼达尼布治疗(P=0.002)，少的趋势房车刚度(速度，P=0.07)和增加肺动脉加速度时间纠正周期长度(非洲锥虫/cl，P=0.07)。然而，房车收缩压，总肺阻力指数，冲程容积指数三尖瓣环形平面收缩行走(TAPSE)在vehicle和尼达尼布处理的大鼠之间无差异。心脏重量和Fulton指数(RV/(LV±S))在vehicle和尼达尼布处理的动物之间无差异。尼达尼布处理的动物红细胞压积降低(P=0.03)。我们的肺、内膜和内侧壁厚度的组织学分析在vehicle和尼达尼布治疗的动物中没有差异。

　　使用vehicle或尼达尼布治疗3周后，比较SuHx大鼠的体重、导管、超声心动图和体外测量的概述。参数数据采用不配对t检验，非参数数据采用Mann-Whitneyu检验。数据以平均值±SEM表示。(vehiclen=9，尼达尼布n=12)

　　dP/dt，压强/时间；速度、舒张倒电容；LV，左心室；PAAT/cl，肺动脉加速时间除以周期长度；房车，右心室；右心室舒张末期内径；右心室收缩压；右心室壁厚度；年代，隔；SVI，strokevolumeindex；TPRI，总肺阻力指数；逐渐变小，三尖瓣环状平面收缩偏移。

　　在实验中，尼达尼布不能减少肺血管的重建，而SU5416联合4周缺氧(10%O2)可诱发大鼠肺动脉高压(vehiclen=4，尼达尼布n=6)。第八周，形成晚期肺病变时，给大鼠灌胃液或尼达尼布(50mg/kg)治疗3周(A)。肺血管内膜和内侧壁厚度未发生变化。每只大鼠共测量19-50条血管。数据以平均值±SEM(B)表示。

　　尼达尼布改善SuHx大鼠的RV适应

　　通过增加右心室舒张刚度检测到心脏纤维化，被认为是肺动脉高压患者右心室衰竭的原因之一。由于尼达尼布对心脏的抗纤维化作用尚不清楚，我们评估了尼达尼布治疗是否能减少RV纤维化。动物模型采用微细红染色法测定总胶原蛋白。我们观察到尼达尼布处理大鼠右心室总胶原蛋白的减少。为了评估胶原沉积情况，我们通过RT-PCR和免疫荧光染色定量测定右心室的I和III型胶原。

　　I型胶原在mRNA水平上显著降低。免疫荧光染色观察到较少的III型胶原，但不影响胶原的I/III比例。为了探讨TGF-TGF介导的尼达尼布在肺动脉高压大鼠右心室的抗纤维化特性，我们量化了RV组织中结缔组织生长因子mRNA的水平。结缔组织生长因子不受尼达尼布处理的抑制。

　　尼达尼布抑制心肌纤维化、骨桥蛋白-1和肥厚。在右心室，尼达尼布(对照组n=9条白条，尼达尼布n=12条灰色条)治疗显示I型胶原和骨桥蛋白-1转录水平显著降低4倍。数据显示为平均值，条形图表示从min到max(A)。尼达尼布处理的大鼠右心室的微细红染色显著下降(P=0.02)。免疫荧光染色显示III型胶原在尼达尼布组中显著下降(P<0.001)。比例条表示100°m(C)。I型胶原蛋白水平未发生变化(每只动物3张RV图)。鳞片提示100°m(D)，右心室肥厚较少(P=0.009)。量表条表示150流量表m(E)，参数数据采用不配对t检验，非参数数据采用Mann-Whitneyu检验。数据以平均值±SEM(B-E)表示。车辆n=9，尼达尼布n=12(A-E)。

　　尼达尼布对心肌成纤维细胞纤连蛋白的影响。用尼达尼布治疗两株人心肌成纤维细胞(1个ohM，24h)，观察该化合物对纤维连接蛋白产生的影响。两个实验的代表性westernblot结果显示。westernblot检测以Vinculin作为定量对照。致密定量的印迹显示，纤连蛋白，一种纤维化的测量，显著降低尼达尼布(P=0.002)。配对t检验(n=4)。数据以平均值±SEM表示。尼达尼布一盒多少钱？尼达尼布可以找代购吗？如果需要的患者可以联系康安途，康安途是专业的做海外医疗的，详情请扫码咨询：