莫洛匹韦（Molnupiravir）对HCoV-NL63的抗病毒作用

　　莫洛匹韦处理对Caco2细胞系中HCoV-NL63复制的剂量依赖性抑制。通过qRT-PCR定量的细胞内病毒RNA归一化为管家基因GAPDH，并相对于对照（CTR）（设置为1）（n=6）呈现。在处理Caco2细胞系中不同浓度的莫洛匹韦时，复制HCoV-NL63基因组RNA的中间体dsRNA（红色）的免疫荧光显微镜分析。

　　莫洛匹韦（Molnupiravir）对HCoV-NL63的抗病毒作用

　　细胞核由DAPI（蓝色）可视化。Caco2细胞在不同浓度莫洛匹韦的处理中以0.1的MOI感染HCoV-NL6344448小时。通过qRT-PCR定量细胞上清液中的病毒产量。通过MTT测定测定细胞毒性。使用GraphPad Prism 8.0.2软件基于模型Y=100/（1+10^（LogEC50-X））计算了一半最大有效浓度（EC50）和一半最大细胞毒性浓度（CC50）。Caco2细胞以MOI为0.5感染HCoV-NL63，然后未经处理或用5μM莫洛匹韦处理5天。每天收集上清液，通过qRT-PCR定量分泌的病毒，计算基因组拷贝数（n=6）。Caco2细胞用0.5MOI HCoV-NL63感染，然后未经处理或用5或50μM莫洛匹韦处理48小时。通过TCID50测定法测定不同组的病毒滴度（n=6）。

　　HCoV-NL63在暴露于未莫洛匹韦（作为对照）或增加莫洛匹韦浓度的Caco2细胞中连续传代20次。在第1-10代中使用5μM莫洛匹韦，在随后的传代中增加到10μM。使用qRT-PCR定量莫洛匹韦（5μM）对在第5，10，15和20代收获的HCoV-NL63的影响。

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